Q1: 可感染细胞的假病毒目前情况
可感染细胞的假病毒目前主要由HIV骨架和VSV骨架两种，两种病毒都可以用于细胞实验和动物实验，VSV骨架假病毒做动物实验效率会略好一些。我们的假病毒是HIV骨架的。
HIV骨架假病毒三个质粒=慢病毒(HIV)的包装质粒+新冠S蛋白包膜外壳+载体质粒（含有GFp和荧光素酶）
VSV骨架假病毒三个质粒=水泡性口炎病毒载体（VSV）的包装质粒+新冠S蛋白包膜外壳+载体质粒（含有GFp或荧光素酶）
假病毒的动物实验：先用腺病毒让动物的部分组织或器官有ace2细胞的过表达，在用可感染细胞的假病毒进行侵染实验
| 类别 |
产品情况 |
货号 |
名称 |
| 原始株 |
有 |
BDAA0026 |
FNV-SARS-CoV-2-S（可感染细胞） |
| Alpha |
无 |
|
|
| Beta |
只有三个点突变株（E484K、K417N、N501） |
BDAA0084 |
FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(E484K、K417N、N501Y) |
| Gamma |
只有三个点突变株（E484K、K417N、N501） |
BDAA0084 |
FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(E484K、K417N、N501Y) |
| Delta |
有 |
BDAA0115 |
FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(B.1.617.2)(delta) |
| Lambda |
无 |
|
|
| Omicron |
有 |
BDAA0117 |
FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(B.1.1.529)(Omicron) |
Q2: 有感染活性的假病毒内的S基因的3.8k基因序列或引物序列是什么
只提供相关参考文献，序列不对外公布
Q3: 说明书中的mock 是什么
mock是空细胞
Q4: Can it be used in a laboratory cell culture room? Any harm to the laboratory and personnel?
The pseudovirus contains no COVID-19 nucleic acid at all. It only has S protein on its surface and is not replicable. It can be used in laboratory cell rooms and is not pathogenic. What is written in our instruction manual is relatively conservative.
Q5: Can the cell-infecting COVID-19 pseudovirus infect mice?
Our pseudovirus of the novel coronavirus has been tested on animals, but the results were not good and it could not be detected. It is not recommended for infecting mice.
Q6: 可感染细胞的假病毒目前情况
可感染细胞的假病毒目前主要由HIV骨架和VSV骨架两种，两种病毒都可以用于细胞实验和动物实验，VSV骨架假病毒做动物实验效率会略好一些。我们的假病毒是HIV骨架的。HIV骨架假病毒三个质粒=慢病毒(HIV)的包装质粒+新冠S蛋白包膜外壳+载体质粒（含有GFp和荧光素酶）；VSV骨架假病毒三个质粒=水泡性口炎病毒载体（VSV）的包装质粒+新冠S蛋白包膜外壳+载体质粒（含有GFp或荧光素酶）
Q7: PCR quantitative primers
ZsGreen-QPCR-F：ACGAGTCCAAGTTCTACGGC；ZsGreen-QPCR-R：CGGGGATGATCTTCTCGCAG
Q8: 荧光是单荧光还是双荧光
目前都是单荧光，萤火虫的
Q9: 产品颜色
个别产品是偏粉红色，不影响使用
Q10: 可感染细胞的假病毒是怎么构建的
是HIV骨架改造的，加了S蛋白包膜，载体质粒里有GFP和荧光素酶。常规慢病毒三个质粒=慢病毒的包装质粒+VSVG包膜外壳+载体质粒（含有目标基因）；可感染细胞的假病毒三个质粒=慢病毒的包装质粒+新冠S蛋白包膜外壳+载体质粒（含有GFP和荧光素酶）
Q11: 假病毒里的荧光素酶用什么试剂盒激活？
我们用promega 的
Q12: 说明书中的mock 是什么
mock是空细胞
Q13: 假毒是HIV骨架吗
是
Q14: 我们的可感染细胞的假病毒，可以侵染Vero细胞么？
侵染Vero细胞没做过测试，目前我们做过测试过的只有经过ACE2过表达的293系列细胞，还有野生型的huh7细胞，但是huh7 的效率不高，还有一个bhk21细胞
Q15: 待感染细胞的每孔用量
1*10的4次方，培养24小时（约增长1.5倍左右，也就是2*10的4次方）
综合：待感染细胞和假病毒病毒的数量比推荐是：1:5~1:1
Q16: Dosage for infectable cells
The amount of pseudovirus that can infect cells in each well of a 96-well plate is 2-10 μ l, and the pseudovirus concentration is 1-10 to the power of 7, with 1 μ l being 10 to the power of 4.
Q17: 我们可感染细胞的假病毒，用检测新冠的S蛋白试剂，可以检测出来的吧？
理论上是可以的，但是我们没检测过
Q18: In neutralization assays, how much reduction is considered effective?
This is hard to define. A 50-70% ratio can be considered to have a relatively good effect.
Q19: 荧光素酶的值
不同仪器、试剂盒不同，大概10的5-6次方
Q20: What is the titer?
Gradient dilution method, greater than 1 × 10 to the power of 7. We use the gradient dilution method. We use the same number of cells. For example, if the number of cells is all 1E+5, if 10ul of the virus is added and all the cells are fully infected, it is overinfection. If 1ul is added and 10% of the cells are infected, then 1ul of the virus has infected 1E+4 cells. Therefore, 1ml can infect 1E+7 cells. It's roughly calculated like this.
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